Совершенно новое оптическое решение заметно увеличивает чувствительность и позволяет скрупулезно исследовать светочувствительные органоиды и люминесцирующие объекты при большом увеличении. Интеркорпорированная система контроля за температурой, влажностью и расходом газа сохраняет культивируемые клетки или срезы тканей в живом состоянии в течение всего времени наблюдения, а специальный светозащищенный корпус предохраняет образец от внешнего света.
Инвертированный микроскоп закрытого типа, созданный для длительного наблюдения за жизнедеятельностью люминесцирующих клеток. Его оптическая схема пересмотрена таким образом, чтобы более детально исследовать светочувствительные люминесцентные объекты на больших увеличениях. Современные приборы для отслеживания параметров окружающей среды позволяют контролировать её параметры: температуру, влажность и расход газа, что позволяет наблюдать культивируемые образцы или ткани в естественной среде обитания на протяжение всего эксперимента. Корпус микроскопа устроен таким образом, что внешний свет не проникает внутрь, защищая клетки и оптические элементы микроскопа.
Наблюдение клеток без внешнего воздействия
Так как люминесцентный свет исходит от самого образца, это не вредит клеткам. Также нет негативно влияющего на наблюдения за живыми клетками флуоресцентного фонового шума и авто-флуоресценции. Получается, что люминесценция – это лучший способ наблюдения за живыми клетками.
Передовая биолюминесцентная микроскопия
Преимущества люминесценции над флуоресценцией:
· лучшее отношение сигнал-фон благодаря отсутствию фонового свечения;
· отсутствие фототоксичности или фотообесцвечивания, что необходимо для количественного отслеживания долгосрочных изменений в экспериментах с живыми клетками.
Люминесценция ранее была ограничена техническими возможностями оборудования. В микроскопе LUMINOVIEW LV200 от Olympus эти ограничения были сняты, позволяя применить метод биолюминесции в коммерческой микроскопии.
Преодоление флуоресцентных ограничений
Флуоресцентные микроскопы и область их применения имеют много преимуществ, но также и целый ряд ограничений, преодолеть которые способна биолюминесцентная микроскопия. Оптическая схема микроскопа LV200 объединяет преимущества флуоресценции и биолюминесценции, создавая прибор, с помощью которого можно получать яркие и высоко детализованные изображения.
Флуоресценция
Флуоресцентное свечение характеризуется коротким временем жизни, высокой яркостью и требует определённого света для возбуждения. Следовательно, такое освещение требуется только в момент получения изображения, а вся оптика должна проводить сильное и полностью управляемое излучение одной длины волны и передавать свечение другой длины волны в глаза пользователя и/или на камеру. Несмотря на такую относительную сложность оптической системы, флуоресцентная микроскопия довольно долго процветала, что позволило сделать открытия во многих областях исследований.
Биолюминесцентная визуализация
Люминесцентное свечение характеризуется разнообразной продолжительностью и зачастую довольно тусклое, но благодаря отсутствию фонового свечения или флуоресценции его можно визуализировать с высоким отношением сигнал-шум. Это делает применение люминесценции для препаратов, где сильна автофлуоресценция, идеальным. Это справедливо для таких случаев, как визуализация целого животного или образцов, содержащих различные химические соединения.
Высокое отношение сигнал-шум без засвечивания и/или токсичности
Биолюминесценция имеет большие преимущества перед обычной флуоресценцией, т.к. она объединяет высокое отношение сигнал-шум и отсутствие засвечивания и фототоксичности. Более того, поскольку люминесцировать могут только жизнеспособные клетки с активным метаболизмом, биолюминесценция является идеальным механизмом для показательной количественной оценки живых клеток. Вышеописанные преимущества более не ограничены макро-наблюдениями и объемными измерениями, а теперь могут также применяться и в микроскопии высокого разрешения.
Изображения высокого качества
Биолюминесцентная система LV200 позволяет получать очень детализированные изображения с использованием стандартных CCD (ПЗС) цифровых камер без использования специализированных камер. Это достигается за счёт высокоспециализированной оптической системы микроскопа, настроенной для улавливания слабых световых сигналов.
Оптимизированный световой путь
Поскольку световой путь от объекта до камеры прямой и максимально короткий, до матрицы камеры долетает максимальное количество света. К тому же отсутствие таких светопоглощающих элементов как зеркала, фильтры и линзы позволяет сохранить ещё больше света. Тубусная линза была спроектирована с чрезвычайно большой числовой апертурой (NA), что обеспечивает повышенную чувствительность по сравнению с обычной оптикой микроскопа. В результате LV200 производит выходной сигнал во много раз сильнее в сравнение с традиционными системами микроскопов, и, следовательно, может быть использован с обычными CCD или EM-CCD цифровыми камерами. LV200 обладает возможностью выбора увеличений в диапазоне от 0,8x до 20x, давая возможность чётко визуализировать образцы, начиная большими сечениями мозга и заканчивая отдельными клетками.
Изображения высокого разрешения
Уникальные оптические характеристики дают возможность детализированного наблюдения единичных клеток доселе недоступных в рамках люминесцентной микроскопии. Данные характеристики позволяют увеличить пространственное разрешение, что даёт возможность легко дифференцировать слабые сигналы вблизи областей с сильным свечением, что невозможно при использовании люменометра.
Использование для лабораторий
Корпус LV200 защищает образцы и оптику от внешнего света, давай возможность работать в лаборатории при обычном свете. Для экспериментов с образцами, которые требуют длительного времени выдержки, микроскоп, возможно, придется перемещать в более тёмную комнату.
Методы наблюдения |
Люминесцентная визуализация, проходящее светлое поле, базовая проходящая флуоресценция |
Корпус LV200 |
Светозащищённый бокс
Соосный XY предметный столик Конденсор, совмещённый со световодом для проходящего света
Крепление типа c-mount для цифровой камеры |
Осветитель |
Внешняя галогеновая лампа, совмещённая со световодом |
Объективы |
Возможно применение любых стандартных объективов Olympus |
Блок управления |
IX-UCB контроллер для управления фильтровыми кольцами и осветителем |
Ручное управление |
Ручное\ управление фильтровыми кольцами и осветителем |
Контроль параметров окружающей среды |
Двухконтурный мини-инкубатор для установки на столик микроскопа для 35-мм посуды, включает в себя: блок управления, подогрев предметного столика, подогрев верхней крышки, подогрев основного корпуса, подогрев объектива, газовый расходомер для смеси 5% CO2, 95% воздуха |
Габаритные размеры |
Около 600(Ш) х 600(Г) х 700(В) мм |
Камеры цифровые |
В зависимости от области применения и требуемой чувствительности: CCD камеры охлаждаемые EM-CCD камеры или CCD камеры для медленного сканирования с очень сильным охлаждением (Требуется уточнить совместимость камер/ПО) |
Потребляемая мощность |
Основной прибор 850 В·А |
Место установки |
Около 1500(Ш) х 750(Г) мм (зависит от конфигурации) |
Общий вес |
Около 70 кг (зависит от конфигурации) |